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紅細胞裂解液的原理說明與使用方法

更新時間:2024-10-12      點擊次數(shù):273

紅細胞裂解液是一種去除紅細胞簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細胞,它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。

原理說明

利用細胞內(nèi)外的離子濃度差異,形成滲透壓差,外部的水分會擴散至細胞內(nèi),使紅細胞膨脹,達到裂解的效果。

紅細胞裂解液效.jpg

使用方法

1.裂解紅細胞

(1) 向 1 份待裂解的新鮮全血中加入 3 倍體積的紅細胞裂解液(如 1mL 新鮮全血加入 3mL 紅細胞裂解液)輕輕渦旋或顛倒混勻?!咀ⅰ浚喝绻麑π迈r組織細胞進行處理需經(jīng)胰酶等消化成單個細胞懸液后離心收集細胞后再進行后續(xù)操作。

(2) 冰上孵育 15 min,其間輕輕渦旋混勻 2 次?!咀ⅰ浚杭t細胞裂解后,溶液應該是清亮透明的。

2.收集白細胞

(1)在 4℃,450×g 離心 10 min 收集白細胞,小心吸棄上清液。

(2) 向以上沉淀中加入兩倍體積的紅細胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細胞(例如起始血液為 1 mL,則加入 2 mL 的紅細胞裂解液)。

(3) 在 4℃,450×g 離心 10 min 收集白細胞,小心并吸去上清液。

(4) 重懸細胞,用于后續(xù)實驗?!咀ⅰ浚喝缣崛?RNA,最好從此步開始使用無 RNase 的溶液進行。

紅細胞裂解液產(chǎn)品

[名稱] 李記生物

[名稱] 紅細胞裂解液

[貨號] AP01L106

[規(guī)格]  100mL


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