簡(jiǎn)要描述:EZ640TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(遠(yuǎn)紅熒光)采用 TUNEL 法,應(yīng)用末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡細(xì)胞斷裂DNA 的3´-OH 末端催化摻入EZ 640-dUTP。 TUNEL法可以選擇性的檢測(cè)凋亡細(xì)胞, 而非壞死細(xì)胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細(xì)胞。
產(chǎn)品分類(lèi)
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品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | AC12L058/AC12L059 |
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規(guī)格 | 20T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí), 會(huì)激活一些 DNA 內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組 DNA,產(chǎn)生180bp-200bp 的 DNA 片段,表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)的特異的梯狀 Ladder 圖譜?;蚪M DNA 雙鏈或單鏈斷裂時(shí)會(huì)出現(xiàn)產(chǎn)生大量的粘性 3'-OH 末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化作用下,與dUTP 結(jié)合,從而通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀直接進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè),這類(lèi)方法稱(chēng)為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(Terminal - deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒(méi)有 DNA 的斷裂,因而沒(méi)有 3'-OH 形成,很少能夠被染色。Tunel 法可以對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞,因而在細(xì)胞凋亡的研究中廣泛采用。
本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況??蛇x擇性的檢測(cè)凋亡細(xì)胞,而非壞死細(xì)胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細(xì)胞。本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡,耗時(shí)短,只需一步染色反應(yīng),洗滌后即可檢測(cè)。
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
EZ 640 TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(遠(yuǎn)紅熒光) | AC12L058 | 20 T |
EZ 640 TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(遠(yuǎn)紅熒光) | AC12L059 | 50 T |
產(chǎn)品組分
組分 | 20 T | 50 T |
A.EZ 640 TUNEL Reaction Buffer | 1 mL | 2 × 1.25 mL |
B.TdT Enzyme | 40 μL | 100 μL |
C.Proteinase K (2 mg/mL) | 40 μL | 100 μL |
D.DNase I (2 U/μL) | 5 μL | 13 μL |
E.10 × DNase I Buffer | 100 μL | 260 μL |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光保存,有效期24個(gè)月。【注】:組分 A 需避光保存,避免反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)材料(自備)
PBS緩沖液(1×,pH~7.4)
0.4% Triton X-100(PBS配制)
0.1% Triton X-100(PBS配制,其中含5 mg/mL BSA)
4%多**醛(PBS配制)
免疫組化筆
脫蠟溶劑(石蠟切片樣本)
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抗熒光淬滅封片劑
ddH2O
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底,再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
染色背景較重或非特異性著色明顯時(shí)可適當(dāng)減少染色時(shí)間。
實(shí)驗(yàn)時(shí)建議增加陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照組。
組分A使用時(shí)請(qǐng)佩戴口罩、手套,如接觸皮膚,請(qǐng)立即用大量水沖洗。
熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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